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酵母细胞壁吸附作用检测酵母多糖
发表时间:2019-05-07     阅读次数:     字体:【

  1不同毒素吸附剂的性能。

  根据Phillips教授1998年在毒理科学上发表的研究结果显示,沸石粉及膨润土对黄曲霉素几乎没有吸附效果,使用后动物胚胎早期受黄曲霉素攻击导致的胚胎早期吸收率到80%,没有被吸收的胚胎难以发育成正常的胎儿,根据美国霉菌毒素委员会发表的资料,许多在世界上以新理念著称的产品在对比研究中显示只有非常低的吸附能力,说明所有的新理念必须通过系统的实验室研究及广泛的实际应用加以鉴定才能证明其是否真正有效,毒素吸附能力的科学比较方法早在20年前在美国及欧洲已建立,然而至今在中国还在为如何比较进行广泛的讨论,其实从欧美科学文献上直接参考,既有助于我们找对方向,也节省我们的时间,其中发表于美国霉菌毒素手册,T,D,Phillips教授发表的多篇研究文献最具有参考价值,亚洲著名的毒理学家Komk酵母提取物richPimpukdee博士发表于曼谷大学学报上的关于亚洲市场上霉菌毒素吸附能力排行榜具有较高的参考价值。

  2部分毒素吸附剂的副作用。

  根据曼谷大学公布的亚洲霉菌毒素吸附剂吸附能力排行榜资料目前市场上众多毒素吸附剂品牌不具备选择吸附的特点,多数是吸附毒素能力差,吸附营养能力强,而有文献被证明具备选择吸附(只吸毒素,不吸营养物)的产品才是好的产品。

  由于部分品牌毒素吸附剂的吸营养特点,已经在使用一段时间后显示其严重的副作用,如母猪产奶显著减少,种猪蹄裂现象明显增多,母猪缺钙现象明显。

  美国霉菌毒素委员会的研究成果显示霉菌毒素的核心危害作用是对免疫系统的破坏及对免疫应答的强烈抑制,从而将动物预置于被感染的环境之中,导致对疾病的易感性增强,抗病力下降,这是目前中国养猪生产普遍存在而被忽略的领域。

  啤酒酵母A,1原理。

  根据β-葡聚糖和甘露寡糖在流动相和液相色谱柱的固定相之间具有不同的分配系数,将样品注入液相色谱柱,用H2O做流动相,糖类分子流出后,经示差检测器检测,用外标法定量。

  A,2试剂和材料。

  除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂,蒸馏水或去离子水或符合GB/T6682中规定的一级水或相当纯度的水,试验中所用制品按GB/T603的规定制备。

  A,2,1盐酸:37%。

  A,2,2乙腈:色谱纯。

  A,2,3氢氧化钠:40%。

  A,2,4葡萄糖和甘露糖混合标液(1000mg/L):分别称取葡萄糖和甘露糖各0,100g,用纯水定容100mL后用0,45μm微孔滤膜过滤,备用。

  A,3仪器。

  A,3,1水浴锅。

  A,3,2漩涡混合器。

  A,3,3电炉。

  A,3,4手提式压力蒸汽酵母硒灭菌锅。

  A,3,5高压液相色谱仪,带示差检测器。

  A,4分析步骤。

  A,4,1样品处理。

  精确称取1,000g(准确至0,0002g)样品放入一个20mL的耐热玻璃制的带螺帽的小试管中,加入7,5mL盐酸(37%),小心的将小瓶盖近后用漩涡混合器混合,得到均一的悬浮液,将小瓶放入30℃水浴中处理45min,每15min用漩涡混合器震荡混合一次,然后将悬浮物定量的转移到200mL杜氏瓶中(同时用约70-80mL的水洗涤后倒入瓶中),将瓶子放入高压灭菌锅121℃处理60min,完成后马上冷却,将溶液调pH到6-7,然后定容至200mL,使用0,45微米孔径的醋酸纤维素膜过滤备用。

  A,4,2测定。

  A.4,2,1液相色谱参考条件。

  A.4,2,1.1色谱柱:HyperREZXPCarbohyd富硒酵母rateCa++,长300mm,内径7,7mm,粒径8μm。

  A.4,2,1.2柱温:70℃。

  A.4,2,1.3流动相:H2O,用前过0,22μm滤膜。

  A.4,2,1.4流速:0,6ml/min。

  A.4,2,1.5进样体积:40μl。

  A,4,3标准曲线的绘制。

  分别吸取甘露糖/葡萄糖标液12,5,25,0,37,5mL到50mL容量瓶中,用高纯水定容到刻度,得到甘露糖,葡萄糖各为250,500,750,1000mg/L的混合标样,在上述色谱条件下准确进样40μl,得到色谱峰面积和标准物质量浓度之间的回归方程,绘制标准曲线。

  A,4,4样品的测定。

  在同样的色谱条件下,将处理好的样品注入色谱仪中,记录各色谱峰的保留时间和锋面积,用糖标样色谱峰的峰面积来定量,计算出样品中葡萄糖,甘露糖的含量。

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